《难经·六十八难》曰：五脏六腑，皆有井荥俞经合，皆何所主？
然：井主心下满，荥主身热，俞主体重节痛，经主喘咳寒热，合主逆气而泄。此五脏六腑井荥俞经合所主病也。
本难通过问答形式，明确提出五脏六腑的井、荥、俞、经、合五输穴各有其特定的主治病证，是针灸学五输穴应用的纲领性论述。五脏六腑皆有五输穴，其主治规律为：井穴主治心下胀满；荥穴主治发热；俞穴主治身体沉重、关节疼痛；经穴主治咳嗽气喘、恶寒发热；合穴主治气逆上冲、下泄。
问：五脏六腑都有井、荥、俞、经、合这些腧穴，它们各主治什么病证呢？
答：井穴主治心下胀满；荥穴主治身体发热；俞穴主治身体沉重、关节疼痛；经穴主治咳嗽气喘、恶寒发热；合穴主治气机上逆以及腹泻下泄。这就是五脏六腑井、荥、俞、经、合五输穴所主治的各类病证。
井穴位于四肢末端，为经气所出之处，如水之源头。井穴属木（阴经）或属金（阳经），木气通于肝，肝气郁结则心下满闷。
荥穴位于指掌关节或跖趾关节之前，为经气开始流动之处，如水之初流。荥穴属火（阴经）或属水（阳经），火性炎热，故荥穴主治热病。
俞穴位于指掌关节或跖趾关节之后，为经气渐盛之处，如水之灌注。俞穴属土（阴经）或属木（阳经），土应于脾，脾主肌肉四肢，故俞穴主治体重节痛。
经穴位于腕踝关节附近，为经气盛大通行之处，如水之畅流。经穴属金（阴经）或属火（阳经），金应于肺，肺主气司呼吸，外合皮毛，故经穴主治喘咳寒热。
合穴位于肘膝关节附近，为经气深入汇合之处，如水之归海。合穴属水（阴经）或属土（阳经），水应于肾，肾主纳气、司二便，故合穴主治逆气而泄。
五输穴与五行有严格的配属关系，这是理解其主治规律的理论基础。
| 五行 | 木 | 火 | 土 | 金 | 水 |
|---|---|---|---|---|---|
| 阴经 | 井（木） | 荥（火） | 俞（土） | 经（金） | 合（水） |
| 阳经 | 井（金） | 荥（水） | 俞（木） | 经（火） | 合（土） |
阴阳经五输穴五行配属的区别： 阴经井穴属木，阳经井穴属金，此"阳井金、阴井木"的规律源于五行相生关系。阴经从木开始，阳经从金开始，体现了阴阳互根、刚柔相济之义。
阴经井穴属木，木应于肝，肝主疏泄、调畅气机。心下满为肝气郁结、气机不畅所致。针刺井穴可疏肝理气、开郁通滞。阳经井穴虽属金，但"井"为经气之始出，其势向上向外，故亦有升散开郁之功。《灵枢·九针十二原》云："所出为井"，井为源头，源头不通则满闷，通其源则满自消。
阴经荥穴属火，火应于心，心主血脉、主神明。身热为热邪入于血脉所致。针刺荥穴可清热泻火。阳经荥穴虽属水，但"荥"为经气开始流动之处，气动则生热，故荥穴无论阴阳经皆可治热。《灵枢》云："所溜为荥"，荥为经气流动渐盛之处，邪热初入，取荥穴清之最宜。
阴经俞穴属土，土应于脾，脾主肌肉四肢。体重节痛为湿邪困脾、脾失健运所致。针刺俞穴可健脾除湿、通利关节。阳经俞穴虽属木，但"俞"为经气输注之处，气输于内则内应于脏腑，外应于筋骨关节。经脉之气在俞穴处由浅入深，邪气留连肌肉关节则见体重节痛，取俞穴可调达经气以祛邪外出。
阴经常穴属金，金应于肺，肺主气司呼吸、外合皮毛。喘咳为肺气上逆，寒热为外邪客表。针刺经穴可宣肺平喘、调和营卫。阳经常穴虽属火，但"经"为经气通行之大路，经气在此盛大，正邪交争明显，故见喘咳寒热之表证。经穴正当关节之处，为经气流行之要冲，取之可疏通经络、调和气血。
阴经合穴属水，水应于肾，肾主纳气、司二便。逆气为肾不纳气，下泄为肾失封藏。针刺合穴可补肾纳气、固涩止泄。阳经合穴虽属土，但"合"为经气深入汇合之处，内连脏腑。合穴位于肘膝关节附近，为经气由阳入阴、由表入里的关键节点，故能调节脏腑气机之升降出入。逆气者降之，下泄者升之，取合穴以调其中。
五输穴的主治规律体现了"病在脏者取之井，病在变于色者取之荥，病在时间者取之俞，病在音者取之经，病在胃及饮食不节取之合"的《灵枢》原则，并与五行理论高度统一：
主穴： 少商（肺经井）、隐白（脾经井）、中冲（心包经井）
配穴： 内关（心包经络穴）、足三里（胃经合穴）
操作： 少商、中冲点刺放血，隐白毫针刺入0.1寸，用泻法。适用于心下痞满、胸闷气短、心烦不安等证
方义： 井穴为经气所出之处，刺之可通调气机，祛除郁滞。配内关以宽胸理气，足三里以和胃降逆
主穴： 鱼际（肺经荥）、内庭（胃经荥）、行间（肝经荥）
配穴： 大椎（督脉）、曲池（大肠经合）、合谷（大肠经原）
操作： 毫针刺入0.5寸，用泻法，留针20分钟。高热者可配合大椎点刺放血
方义： 荥穴属火，为清热要穴。配大椎为诸阳之会，增强退热之力；曲池、合谷为清热之常用配穴组合
主穴： 太白（脾经俞）、太冲（肝经俞）、太溪（肾经俞）
配穴： 阳陵泉（胆经合、八会之筋会）、足三里（胃经合）、阿是穴
操作： 毫针刺入0.5-1寸，可补可泻，寒湿者加灸。关节痛甚者可用温针灸
方义： 俞穴属土，土主肌肉，为经气输注之处。体重节痛多责之脾湿，取太白健脾除湿；太冲为肝经俞穴，肝主筋，取之以舒筋通络；太溪为肾经俞穴，肾主骨，取之以强腰壮骨
主穴： 经渠（肺经常）、阳溪（大肠经常）、解溪（胃经常）
配穴： 肺俞（背俞穴）、风门（足太阳经）、列缺（肺经络穴）
操作： 毫针刺入0.3-0.5寸，寒证用补法加灸，热证用泻法。背俞穴可向脊柱方向斜刺
方义： 经穴属金，金应肺，经渠为肺经常穴，正治肺系咳喘；阳溪为大肠经常穴，肺与大肠相表里，取之通腑气以宣肺气；配肺俞、风门以宣肺散邪、调和营卫
主穴： 足三里（胃经合）、尺泽（肺经合）、阴陵泉（脾经合）
配穴： 中脘（任脉、胃募）、天枢（大肠募）、关元（任脉、小肠募）
操作： 足三里直刺1-1.5寸，用补法或平补平泻。呕吐者内关配足三里，泄泻者天枢配足三里，虚寒者加灸关元
方义： 合穴属水，水主封藏，取合穴以固下元。足三里为胃经合穴，胃之下合穴，主治一切胃肠病证，可升清降浊、调和中焦气机；尺泽为肺经合穴，肺主气，配之可降逆气
基于五行生克关系，五输穴可用于子母补泻配穴：
滑寿曰："井主心下满者，井为木，木主肝，肝气郁结则心下满，取井穴以疏肝理气也。荥主身热者，荥为火，火主心，心热则身热，取荥穴以清心泻火也。俞主体重节痛者，俞为土，土主脾，脾主肌肉四肢，湿困脾则体重节痛，取俞穴以健脾除湿也。经主喘咳寒热者，经为金，金主肺，肺合皮毛，邪客肺则喘咳寒热，取经穴以宣肺散邪也。合主逆气而泄者，合为水，水主肾，肾主纳气、司二便，肾不纳气则逆气，肾失封藏则下泄，取合穴以补肾固涩也。"
徐灵胎曰："此节明五输穴所主之病也。五脏六腑皆有井荥俞经合，然其主治各异。井者，经气所出，如水之源，心下满为气壅于上，故取井穴以通之。荥者，经气所溜，如火之始燃，身热为火邪外发，故取荥穴以清之。俞者，经气所注，如物之输送，体重节痛为湿邪留着，故取俞穴以运之。经者，经气所行，如经水之流通，喘咳寒热为邪客于表，故取经穴以散之。合者，经气所入，如百川之归海，逆气而泄为升降失常，故取合穴以调之。此皆五输穴自然之性能，非勉强牵合也。"
徐灵胎特别强调，五输穴的主治不是人为设定的，而是基于各穴的生理位置、经气运行特点以及五行属性自然形成的。因此临床应用时应遵循这一规律，但不可拘泥。
倪海厦医师对六十八难有精辟的临床解读：
倪师强调，五输穴是针灸的基础，掌握六十八难的五输穴主治规律，临床上遇到相应病证就能快速定位取穴。
张景岳曰："五输之主治，皆本于五行之理，非苟然而已。井主心下满，木能疏土也；荥主身热，火能胜热也；俞主体重节痛，土能胜湿也；经主喘咳寒热，金能调气也；合主逆气而泄，水能封藏也。然此特言其大略，临证之时，须审证求因，不可执一。"张景岳特别指出五行生克制化在五输穴主治中的运用，同时强调临床辨证的重要性——五输穴的主治规律是纲领性的，具体应用时还需结合病证的具体表现灵活变通。
杨继洲在《针灸大成》中详细列举了五输穴的应用：
杨氏还指出，临床针刺五输穴时，应根据四季不同调整深浅："春刺井、夏刺荥、季夏刺俞、秋刺经、冬刺合"，体现了时间针灸学思想。
根据"虚则补其母、实则泻其子"原则，取五输穴进行补泻：
| 脏腑 | 虚证补母 | 母穴 | 实证泻子 | 子穴 |
|---|---|---|---|---|
| 肺（金） | 太渊（土） | 俞穴 | 尺泽（水） | 合穴 |
| 大肠（金） | 曲池（土） | 合穴 | 二间（水） | 荥穴 |
| 脾（土） | 大都（火） | 荥穴 | 商丘（金） | 经穴 |
| 胃（土） | 解溪（火） | 经穴 | 厉兑（金） | 井穴 |
| 心（火） | 少府（木） | 荥穴 | 神门（土） | 俞穴 |
| 小肠（火） | 后溪（木） | 俞穴 | 小海（土） | 合穴 |
| 肝（木） | 曲泉（水） | 合穴 | 行间（火） | 荥穴 |
| 胆（木） | 侠溪（水） | 荥穴 | 阳辅（火） | 经穴 |
| 肾（水） | 复溜（金） | 经穴 | 涌泉（木） | 井穴 |
| 膀胱（水） | 至阴（金） | 井穴 | 束骨（木） | 俞穴 |
子午流注针法以五输穴为基础，按天干地支时辰开穴：
俞穴（阴经）与原穴位置相同，如太渊（肺经俞穴亦为原穴）、太冲（肝经俞穴亦为原穴）。五输穴中的俞穴与原穴关系密切，临床取原穴可调节本脏腑功能，配络穴可疏通表里两经，形成"原络配穴法"：
患者： 女性，45岁，因工作压力大致胸闷胁胀、心下痞满、纳呆嗳气半月。
辨证： 肝气郁结，横逆犯胃，气机壅滞心下。
取穴： 少商（肺经井穴）点刺放血；隐白（脾经井穴）浅刺0.1寸；配内关、足三里。
疗效： 针后患者即感胸中舒畅，心下痞满明显减轻。续针三次，诸症消失。
分析： 井穴为经气所出，刺少商以宣通肺气、开郁散结，刺隐白以调中焦气机。配内关宽胸理气，足三里和胃降逆，共奏疏肝理气、开郁消痞之功。
患者： 男性，38岁，双膝关节肿痛、身体困重、步履艰难两周，伴脘痞纳呆、舌苔黄腻。
辨证： 湿热下注，痹阻关节，脾湿不运。
取穴： 太白（脾经俞穴）用泻法，太冲（肝经俞穴）用泻法；配阴陵泉、足三里、阳陵泉。
疗效： 针刺三次后关节肿痛减轻，体重感消失。续治十次，关节活动自如。
分析： 俞主"体重节痛"，取脾经俞穴太白以健脾除湿，肝经俞穴太冲以疏肝通络。阴陵泉健脾利湿，足三里调中益气，阳陵泉为筋会舒筋活络，诸穴合用湿热得清、痹痛得除。